Beschreibung
The RealStar® Chikungunya RT-PCR Kit 1.0 ist ein in vitro Test basierend auf der Real-Time Technology für die qualitative Bestimmung von Chikungunya Virus (CHIKV) spezifischer RNA.
LOINC
(Logical Observations, Identifiers, Numbers and Codes
(Regenstrief-Institute))
60260-7
Ziel und Zweck der Untersuchung
Der Test dient dem qualitativen Nachweis von Chikungunya Virus (CHIKV) spezifischer RNA. Chikungunya Infektionen finden sich immer wieder bei Reisenden die aus tropischen Regionen zurückkehren. Die klinische Symptomatik erlaubt oft keine Differenzierung von anderen Flavivieren Infektionen. Die PCR dient neben der serologischen Testung somit der Bestätigung einer Infektion.
Prinzip des Verfahrens
Der Test basiert auf der realtime-PCR Technologie. Mit Hilfe der Reversen Transciptase Reaktion wird RNA in eine komplementäre DNA (cDNA) umgeschrieben und mit Hilfe der Polymerase Kettenreaktion und unter Verwendung von spezifischen Primeren und einer spezifischen Sonde amplifiziert und detektiert. Die Proben sind mit einem spezifischen Fluoreszenz-Reporter und einem Quencher markiert. Die Probe spezifisch für CHIK cDNA ist mit FAM markiert während die spezifische Internal Control (IC) mit JOE markiert ist. Dies ermöglicht die parallele Messung beider Signale in spezifischen Kanälen des Detektors. Zusammenfassend besteht der Test aus drei parallelen Prozessen in einem Einzelröhrchen Assay: 1.) Reverse Transcription 2.) PCR Amplifikation der Ziel-cDNA und der Internal Control 3.) Simultane Detektion von PCR amplicons mit Fluoreszenz markierten Proben
Literatur
1.) Development of a quantitative competitive reverse transcription polymerase chain reaction (QC-RT-PCR) for detection and quantitation of Chikungunya virus. Sharma S, Dash PK, Santhosh SR, Shukla J, Parida M, Rao PV.; Mol Biotechnol. 2010 May;45(1):49-55. doi: 10.1007/s12033-009-9238-9. 2.)Performance of the RealStar Chikungunya virus real-time reverse transcription-PCR kit. Panning M, Hess M, Fischer W, Grywna K, Pfeffer M, Drosten C.; J Clin Microbiol. 2009 Sep;47(9):3014-6. doi: 10.1128/JCM.01024-09. Epub 2009 Jul 22.
Ergebniseinheit
qualitativ
Referenzbereich
nicht nachgewiesen
Analysenfrequenz
bei Bedarf, auf Anfrage
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
7 Tage
Spezimen
Serum
Alternative Spezimen
(lt. Beipack)
Plasma, Vollblut
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
2ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Spezielle Präanalytik - Probentransport
keine
Messbereich
negativ/positiv
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Ethanol
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Obwohl eine hoch konservierte Region im CHIKV Virus Genom Verwendung findet kann eine Crossreaktivität mit einigen Genotypen des nahe verwandten O’nyong nyong virus (ONNV) nicht ausgeschlossen werden.
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