Beschreibung
Quantitative Bestimmung von Tumor Necrosis Factor alpha (TNFα) in Serum. Der Assay erkennt natürliches und rekombinantes humanes TNFα.
LOINC
(Logical Observations, Identifiers, Numbers and Codes
(Regenstrief-Institute))
L:3074-2
Ziel und Zweck der Untersuchung
TNFα ist ein multifunktionales proinflammatorisches Zytokin, das hauptsächlich von Makrophagen ausgeschüttet wird und bei Entzündungsreaktionen auf die Aktivität verschiedener Immunzellen regulierend einwirkt. Die TNFα Serumkonzentration ist bei gesunden Individuen sehr gering und liegt oftmals nur geringfügig oberhalb der Nachweisgrenze. Erhöhte TNFα-Serumwerte werden bei chronischen Entzündungen wie zum Beispiel Morbus Crohn, Colitis ulcerosa oder rheumatoider Arthritis gefunden.
Prinzip des Verfahrens
Immunoassays mit Luminex-Technologie, bei der mikrokopisch kleine Polystyrolpartikel, sogenannte Mikrosphären oder Beads als Festphase für die biochemische Nachweisreaktion dienen. Farbcodierten magnetische Mikropartikel sind mit analytspezifischen Antikörpern vorbeschichtet. Mikropartikel, Standards und Proben werden mit immobilisierten Antikörpern, die sich mit dem Analyten binden, vermischt. Nach Abwaschen aller ungebundenen Substanzen wird ein spezifischer, mit Biotin konjugierter Antikörper zugegeben. Nach neuerlichem Waschschritt wird Streptavidin-Phycoerythrin-Konjugat (Streptavidin-PE) zugegeben, das an den biotinylierten Antikörper bindet. Ein neuerlicher Waschschritt entfernt ungebundenes Streptavidin-PE. Die Mikropartikel werden in Puffer resuspendiert und mit dem Luminex Gerät analysiert. Ein Magnet im Analysator hält die superparamagnetische Mikropartikel in einer Monoschicht. Zwei spektral unterschiedliche lichtemittierende Dioden (LEDs) beleuchten das Mikropartikel. Eine LED identifiziert den Analyten, der gerade detektiert wird, und die zweite LED bestimmt die Intensität des Signals, die mit der Konzentration des gebundenen Analyten direkt proportional ist.
Literatur
Beutler, B. & Cerami, A. The history, properties, and biological effects of cachectin. Biochemistry, 1988;33:7575–82 Vilcek, J. & Lee, T.H. Tumor necrosis factor. New insights into the molecular mechanisms of its multiple actions. The Journal of biological chemistry, 1991;266:7313–6 Croft M et al. TNF superfamily in inflammatory disease: translating basic insights. Trends Immunol. 2012;33:144-52
Ergebniseinheit
pg/ml
Referenzbereich
bis 32 pg/ml
Synonyme
keine
Analysenfrequenz
14 Tage
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
entällt
Spezimen
Serum
Alternative Spezimen
(lt. Beipack)
keine
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Spezielle Präanalytik - Probentransport
entfällt
Messbereich
0,76-3100 pg/mL
klinische Sensitivität
entfällt
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
keine bekannt
klinische Spezifität
entfällt
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Rekombinanter humaner TNF RI interferiert ab Konzentrationen > 25 ng/mL in diesem Assay
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